Botulismul este o boală rară, dar gravă, cauzată de o bacterie numită Clostridium botulinum, care se găsește în sol. Aceasta produce o toxină neurotropică. Există trei tipuri de botulism, și anume: botulismul de origine alimentară, botulismul de plagă și botulismul infantil. Botulismul de origine alimentară provine din consumul de alimente contaminate cu toxina. Rănile infectate cu bacterii producătoare de toxină duc la botulism de plagă. Iar botulismul infantil apare atunci când sporii de C. botulinum germinează și produc toxina în tractul gastro-intestinal al sugarilor prin consumarea bacteriei, de obicei din miere. Toate aceste trei forme de botulism pot fi mortale și reprezintă urgențe medicale.

C. botulinum este o bacterie anaerobă, Gram-pozitivă, cu formă de tijă care formează spori și care produce toxina botulinică. Toxina botulinică este una dintre cele mai puternice toxine cunoscute (aproximativ un microgram este letal pentru om) care provoacă boala neuroparalitică severă. Există șapte tipuri de neurotoxină botulinică distincte din punct de vedere serologic – tipurile A, B, C, D, E, F și G1. Compararea secvențelor de ARNr 16S a arătat că tulpinile de C. botulinum formează patru grupuri distincte care corespund la patru grupe fiziologice (I-IV), ceea ce a susținut schema de clasificare istorică bazată pe parametri biochimici și biofizici2. Tulpinile din grupa I (C. botulinum proteolitic) produc una sau uneori două toxine de tip A, B sau F; tulpinile din grupa II (C. botulinum neproteolitic) produc toxine de tip B, E sau F; tulpinile din grupa III produc toxine de tip C sau D; iar tulpinile din grupa IV produc toxina de tip G3,4.

Netrotoxina botulinică de tip A (BoNT/A) este cel mai studiat pe scară largă și cel mai bine caracterizat dintre serotipurile BoNT. Un studiu al literaturii științifice indică faptul că există aproximativ de trei ori mai multe publicații despre BoNT/A decât următorul serotip cel mai frecvent, BoNT/B5. În Statele Unite, între 2001 și 2007, un total de 139 de cazuri de botulism de origine alimentară au fost raportate la Centrele pentru controlul și prevenirea bolilor (CDC). Majoritatea acestor cazuri au fost cauzate de intoxicația cu BoNT/A (76 de cazuri) sau BoNT/E (46 de cazuri), doar 10 cazuri fiind legate direct de consumul de alimente contaminate cu BoNT/B. Cu toate acestea, în aceeași perioadă, BoNT/B a fost agentul cauzal a 387 din cele 663 de cazuri de botulism infantil (58,4%) înregistrate de CDC6.

Toxina botulinică acționează prin blocarea funcției nervoase și duce la paralizie respiratorie și musculo-scheletală. În mod specific, toxina acționează prin blocarea producției sau eliberării de acetilcolină la nivelul sinapselor și al joncțiunilor neuromusculare. Moartea survine din cauza insuficienței respiratorii. Simptomele includ vedere dublă, vedere încețoșată, pleoape căzute, dificultăți de vorbire, dificultăți de înghițire, gură uscată și slăbiciune musculară. În toate cazurile, boala este cauzată de toxina produsă de C. botulinum, nu de bacteria în sine. Medicii pot lua în considerare diagnosticul de botulism dacă istoricul și examinarea fizică a pacientului sugerează botulismul. Cu toate acestea, aceste indicii nu sunt adesea suficiente pentru a permite un diagnostic. Alte boli, cum ar fi sindromul Guillain-Barré, accidentul vascular cerebral și miastenia gravis, pot avea un aspect similar cu botulismul, iar testele speciale pot fi necesare pentru a exclude aceste alte afecțiuni. Aceste teste pot include scanarea creierului, examinarea lichidului cefalorahidian, testul de conducere nervoasă (electromiografie sau EMG) și un test cu clorură de edrofoniu (Tensilon) pentru miastenia gravis.

Un diagnostic cert poate fi pus dacă toxina botulinică este identificată în alimente, în conținutul stomacului sau al intestinelor, în vărsături sau în fecale. Toxina se găsește ocazional în sânge în cazurile acute. Toxina botulinică poate fi detectată printr-o varietate de tehnici, inclusiv prin teste imunoenzimatice (ELISA), teste electrochimiluminiscente (ECL) și inoculare la șoareci sau teste de hrănire. Toxinele pot fi tipizate prin teste de neutralizare la șoareci. În cazul botulismului toxico-infecțios, organismul poate fi cultivat din țesuturi. Pe mediu de gălbenuș de ou, coloniile producătoare de toxine prezintă de obicei irizații de suprafață care se extind dincolo de colonie. Aceste teste de diagnosticare sunt menționate în literatura de specialitate, dar nu sunt disponibile cu ușurință în India. Lipsa de disponibilitate a kiturilor comerciale de diagnosticare, cum ar fi ELISA, lipsa instalațiilor de cultură anaerobă în majoritatea spitalelor și a unităților private, precum și dificultățile tehnice și etice legate de efectuarea testului de neutralizare la șoareci fac confirmarea diagnosticului de botulism foarte dificilă.

Pentru a investiga cazurile suspecte de focare de botulism din India, deoarece nu erau disponibile kituri ELISA, am recurs la testul de neutralizare la șoareci și la teste moleculare, cum ar fi PCR7. Cu toate acestea, antitoxina botulinică necesară pentru a face teste de neutralizare la șoareci nu este ușor de obținut și va fi necesar un număr mare de șoareci pentru a face acest test. Deoarece aceste teste nu sunt teste de diagnostic de rutină, costul implicat și formalitățile necesare pentru a indentifica șoarecii întârzie rezultatele.

Testele moleculare nu pot detecta toxina, dar pot detecta doar genele BONT dacă organismul poate fi cultivat. Genele BONT pot fi, de asemenea, amplificate direct din alimente și din probe clinice, dacă organismele sunt încă prezente acolo.

Ca urmare a faptului că toxina botulinică este un agent bioterorist important, există o nevoie urgentă de a dezvolta teste de diagnosticare interne. Articolul lui Jain et al8 publicat în acest număr a avut ca scop dezvoltarea unui sistem de imunodetecție pentru serotipul B al neurotoxinei botulinice folosind o abordare genetică sintetică. A fost dezvoltat un test ELISA pentru detectarea neurotoxinei botulinice și a fost estimată, de asemenea, limita minimă de detecție. Pentru captarea antigenului a fost utilizat un anticorp specific BoNT/B recombinat. Rezultatele au arătat că BoNT/B recombinant poate fi detectat până la o concentrație de aproximativ 15 ng/ml. ELISA este o tehnică potențială care poate înlocui testul biologic. Sistemul ELISA dezvoltat a fost foarte specific, rapid și ar putea fi aplicat la testarea unui număr mare de specimene.

Anterior, Scotcher et al5 au raportat un sistem ELISA sandwitch pentru detectarea toxinei BoNT/A folosind anticorpi monoclonali specifici cu o bună sensibilitate și specificitate. Au fost dezvoltate diferite formate ELISA care utilizează substraturi fluorescente sau chemiluminiscente pentru a îmbunătăți sensibilitatea testului de 10-100 de ori, dar necesită echipamente mai specializate9. Mai multe teste rapide, sensibile și specifice, cum ar fi PCR în timp real, PCR imună etc., au fost dezvoltate pentru detectarea celulelor C. botulinum, precum și a genelor neurotoxinei. Grupul nostru10 a descris un PCR multiplex pentru detectarea simultană a genelor neurotoxinei botulinice și a toxinei perfringens. Cu toate acestea, aceste metode pot fi puse la dispoziție doar în centrele de referință. Prin urmare, ELISA dezvoltat de Jain et al8 este un pas important pentru diagnosticarea rapidă a toxinei botulinice în probe alimentare și clinice.

Numărul de cazuri de botulism de origine alimentară și infantil s-a schimbat puțin în ultimii ani, dar botulismul prin răni a crescut din cauza consumului de heroină black tar, în special în California11. Deși toxina botulinică este distrusă prin gătire temeinică în decurs de câteva minute, sporul în sine nu este ucis de temperatura atinsă prin fierberea normală la presiunea de la nivelul mării, lăsându-l liber să se dezvolte și să producă toxina atunci când condițiile sunt potrivite. Singura măsură cunoscută de prevenire a botulismului infantil este evitarea hrănirii cu miere a sugarilor cu vârsta mai mică de 12 luni. Tratamentul poate include antitoxine, îngrijiri medicale intensive sau intervenția chirurgicală a rănilor infectate. Prin urmare, diagnosticarea în timp util poate salva vieți.

.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.